| 產(chǎn)品編號 | C-0013 |
| 英文名稱 | WIP (Lysis Buffer for WB/IP Assays, Nondenaturing) |
| 中文名稱 | Western及IP細胞裂解液（非變性） |
| 別 名 | Tissue and Cell Lysis Reagent; Cell lysis buffer for Western and IP; Mammalian Total Protein Extraction Kit; Protein Extraction Kit; Lysis Buffer for WB/IP Assays; WIP (Lysis Buffer for WB/IP Assays) 非變性組織/細胞裂解液; Western/IP細胞裂解液; Western/IP組織細胞裂解液; WB/IP細胞裂解液; 免疫印跡及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液; WB/IP組織細胞裂解液; Western及IP細胞裂解液 |
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Specific References (3) | C-0013 has been referenced in 3 publications.
[IF=3.38] Wei F et al. Diagnostic significance of methylation of PTEN and DAPK in thyroid tumors. Clin Endocrinol (Oxf)
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| 保存條件 | Store at -20℃ stable for 12 months. |
| 注意事項 | This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. |
| 產(chǎn)品介紹 |
Tissue and Cell Lysis Reagent for Western Blot and Immunoprecipitation. A proprietary, non-denaturing formulation of zwitterionic detergents used for the lysis of bacterial cells and extraction of recombinant proteins. 一. Western及IP細胞裂解液使用說明書 產(chǎn)品簡介 WIP組織細胞裂解液(Tissue and Cell lysis solution for Western Blot and Immunoprecipitation )，是一種在非變性條件下裂解細胞的裂解液。本產(chǎn)品裂解細胞獲得的裂解產(chǎn)物，可用于PAGE，蛋白印跡（Western Blot），免疫沉淀(immnolprecipitation，IP)，免疫共沉淀(co-IP) 和蛋白與多肽的分離純化。 WIP裂解液的主要成分為Tris(pH 7.5，20mM)，150mM NaCl，去垢劑Triton X-100以及多種蛋白酶抑制劑,無需自備PMSF、磷酸酶抑制劑等蛋白酶抑制劑。WIP不僅可以用于細胞培養(yǎng)物的裂解，也可直接用于大多數(shù)動物組織的裂解。在有效地裂解組織和細胞的同時，可強烈地抑制蛋白、多肽的降解，并保持原有的分子結(jié)構(gòu)和蛋白間相互作用。 用WIP裂解得到的組織細胞蛋白樣品，可以用博奧森生產(chǎn)的BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的Triton X-100等干擾物質(zhì)，不能用Bradford試劑盒測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。 包裝清單 WIP組織細胞裂解液 30ml PMSF（100X） 0.3ml 保存條件： -20°C保存，一年有效。 注意事項： 1．為獲得最佳的實驗效果，可適當分裝使用，以盡量避免反復凍融。 2．PMSF應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)加。 3．裂解蛋白的所有步驟都需在冰上或4°C進行。 4．蛋白酶抑制劑均有較高的毒性，為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。一旦直接接觸，請立即用流水沖洗，再向醫(yī)療保健結(jié)構(gòu)咨詢。 二.使用方法說明 1．培養(yǎng)細胞 取出WIP裂解液，待融化后，顛倒混勻數(shù)次，適量分裝凍存。在使用前取出，按比例加入PMSF（使其最終濃度為1mM），混勻，立即使用。 貼壁細胞，去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗2-3遍(如血清中的蛋白沒有干擾，也可以不洗)。按6孔板每孔加入100-200微升的比例加入WIP。用槍吹打數(shù)下，使WIP和細胞充分接觸。通常WIP接觸細胞數(shù)秒后細胞就會被裂解。 懸浮細胞，收集培養(yǎng)細胞，離心去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗2-3遍(如血清中的蛋白沒有干擾，也可以不洗)，用手指把細胞用力彈散，按6孔板每孔細胞加入100-200微升的比例加入WIP。如果細胞數(shù)量較大，應(yīng)按50-100萬細胞/管分裝或根據(jù)細胞數(shù)量按比例增加WIP。用手指輕彈管底以促進WIP和細胞充分接觸，裂解完全時應(yīng)無明顯的細胞顆粒。 裂解物經(jīng)10,000-14,000g離心3-5分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。 裂解液用量說明：通常6孔板每孔細胞加入100微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到150微升或200微升。 2．組織樣品 取Ep管，分別稱重標記，把組織剪切成小塊裝入Ep管中，稱重。按每20毫克組織加100-200微升的比例加入WIP(如裂解不完全，可以適當增加WIP的用量；如需要的蛋白樣品濃度較高，可以適當減少WIP的用量)。用手握式電動組織細胞勻漿器勻漿約1分鐘或直至充分裂解。10,000-14,000g離心3-5分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。 如果組織樣品本身非常細小，如淋巴細胞，可直接加入WIP裂解，通過振蕩（Vortex）以使樣品裂解完全 |
| 1、抗體溶解方法 | |
| 2、抗體修復方式 | |
| 3、常用試劑的配制 | |
| 4、免疫組化操作步驟 | |
| 5、免疫組化問題解答 | |
| 6、Western Blotting 操作步驟 | |
| 7、Western Blotting 問題解答 | |
| 8、關(guān)于肽鏈的設(shè)計 | |
| 9、多肽的溶解與保存 | |
| 10、酶標抗體效價測定程序 | |
